Descripción | Detección cualitativa de antígeno fecal de norovirus (genogrupos I y II) mediante enzimoinmunoensayo de microplaca en fase sólida con anticuerpos monoclonales en muestra de heces fresca, refrigerada o congelada. |
Utilidad Clínica | Este examen es para ser utilizado en muestras fecales de pacientes con vómitos y diarrea para determinar específicamente la presencia de norovirus mediante enzimoinmunoensayo (ELISA). Este es un método de diagnóstico más rápido, técnicamente más simple y bastante menos costoso que el de reacción en cadena de polimerasa de trascripción inversa (RT-PCR). El diagnóstico por RT-PCR, sin embargo, es más sensible (menos falso negativos) que por ELISA. La prueba es clínicamente útil en pacientes con gastroenteritis aguda, sea éste un caso individual o parte de un brote epidémico, en los que se sospecha que la causa podría ser un virus enteropatógeno. |
Información clínica | Aunque inicialmente se consideró que ocurría sólo en brotes epidémicos, ahora se reconoce que norovirus ocurre también en casos individuales y es realmente la causa más frecuente de gastroenteritis endémica en adultos y la segunda más frecuente en niños, después de rotavirus (Junquera CG et al. Pediatr Infect Dis J 2009;28:604-7). Norovirus es considerado también uno de los agentes causales más frecuente de diarrea del viajero (Ajami N et al. Clin Infect Dis 2010;51:123-30). La enfermedad comienza típicamente después de un periodo de incubación de 12 a 48 horas con vómitos, fiebre y dolor abdominal, seguido poco después por diarreas acuosas que pueden durar hasta 5 días (Rockx B et al. Clin Infect Dis 2002;35:246-53). En recién nacidos la infección por norovirus puede ser muy severa y presentarse con enteritis hemorrágica y desarrollo de enterocolitis necrosante (Stuart RL et al. Pediatr Infect Dis J 2010;29:644-7). Se han descrito numerosos brotes epidémicos por norovirus involucrando personas de toda edad en hogares de ancianos, cunas infantiles, hospitales, cruceros vacacionales, restaurantes y eventos sociales que incluyen comida contratada (Glass RI et al. N Engl J Med 2009;361:1776-85). Norovirus comprende actualmente cinco genogrupos de los cuales sólo los genogrupos I y II (que tienen 15 y 18 genotipos respectivamente) son patógenos para el ser humano; a pesar de esta diversidad, la mayoría de casos y brotes reportados en los últimos años se deben al genotipo 4 del genogrupo II (Widdowson MA et al. J Infect Dis 2004;190:27–36). El diagnóstico de esta infección tiene el propósito de evitar el uso innecesario de antibióticos en un caso individual o identificar la causa en un brote epidémico y tomar oportunamente las medidas para controlarlo. |
Muestra | Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado |
Recipiente | Frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética |
Volumen | Mínimo 5 mL (5 g) – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes |
Instrucciones para obtención y transporte de la muestra | Obtener la muestra en frasco limpio de boca ancha y tapa hermética. No mezclar la muestra con orina, cremas o talco. Colectar la mayor cantidad posible. En niños pequeños colocar el pañal al revés (por la parte no absorbente), cubrir la salida de la uretra con un trozo de algodón (para no contaminar la muestra con orina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal no son aceptables. Enviar la muestra al laboratorio inmediatamente después de su obtención en caja térmica con refrigerantes. Muestras de lugares fuera de Lima o que no pueden ser enviadas al laboratorio antes de 3 horas desde su obtención deben ser congeladas a -20°C hasta su envío. Muestras en un medio de preservación como Cary-Blair son aceptables para esta prueba. No colectar la muestra en recipientes que contengan formol o compuestos similares, sueros animales, iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes debido a posibles interferencias con la prueba. |
Método de análisis | Enzimoinmunoensayo (ELISA) de microplaca en fase sólida |
Rango de resultados | Positivo o negativo |
Rango normal | No hay antígeno de norovirus |
Tiempo de entrega de resultados | 6 - 12 horas desde recibida la muestra |
Interpretación de resultados | Esta prueba en formato ELISA detecta, mediante anticuerpos monoclonales, antígenos de la cápside de prácticamente todos los genotipos conocidos de norovirus de los genogrupos I y II que pudieran estar presente en la materia fecal. La especificidad de esta prueba es de 99.2% comparada con diagnóstico por reacción en cadena de polimerasa de trascripción inversa (RT-PCR) (Gray JJ et al. Clin Vaccine Immunol 2007;14:1349-55). Un resultado POSITIVO con esta prueba, por tanto, indica firmemente la presencia de norovirus y que este podría ser la causa de los síntomas del paciente. Si el resultado se informa NEGATIVO es probable que norovirus no esté realmente en el intestino. La sensibilidad de esta prueba comparada con RT-PCR es de 76.3% según una evaluación hecha en Japón (Okitsu-Negishi S et al. J Clin Microbiol 2006;44:3784-6) y 69.5% según otra evaluación en Europa (Gray JJ et al. Clin Vaccine Immunol 2007;14:1349-55) por lo que un resultado NEGATIVO con esta prueba no excluye totalmente el diagnóstico. Un resultado falso NEGATIVO puede deberse a una carga viral por debajo del nivel de detección del ELISA al momento de colectar la muestra o a un deterioro del antígeno viral durante su trasporte al laboratorio. Esta prueba es específica para norovirus, un resultado POSITIVO ó NEGATIVO con esta prueba no excluye la presencia de otros agentes enteropatógenos. Esta información es sólo para ser tomada en cuenta. El médico es el más indicado para decidir lo que se deba hacer en base a los síntomas, el cuadro clínico y el resultado de esta prueba. |
Limitaciones y recomendaciones |
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Horario de recepción de muestras | Lunes a Viernes de 7:15 AM a 8:30 PM |
Referencias |
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Última revisión | Septiembre 2010 |