DESCARGAR| Descripción | Determinación cuantitativa de calprotectina en heces mediante inmunoensayo enzimático (ELISA) de microplaca en fase sólida, con anticuerpos monoclonales que se unen específicamente a calprotectina humana. |
| Utilidad clínica | La medición de la concentración de calprotectina en heces puede servir en alguna de las siguientes situaciones clínicas:
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| Información Clínica | Calprotectina es una proteína de la familia de las proteínas S100, de las cuales tres se expresan extracelularmente: S100A8, S100A9 (que asociados forman el complejo calprotectina) y S100A12. Calprotectina constituye el 60% del contenido proteico citosólico de neutrófilos y macrófagos. Cuando estas células participan en la inflamación intestinal, calprotectina se libera en el lumen, aparece en las heces y sirve como un biomarcador de actividad inflamatoria. IBD es una enfermedad orgánica crónica que cursa con dolor abdominal, diarrea y pérdida de peso. Enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa son las principales formas de presentación del IBD. IBS, en contraste, es una enfermedad funcional no-orgánica, no-inflamatoria que se puede expresar con síntomas similares al IBD. El diagnóstico diferencial entre IBD e IBS es fundamental en la gastroenterología clínica. Los niveles fecales de calprotectina están elevados en IBD y no en IBS. Por tanto, la medición de calprotectina fecal proporciona al médico una información valiosa para decidir en forma oportuna si debe enviar un paciente a exploración colonoscópica por un posible IBD. La actividad del IBD se mide tradicionalmente mediante un sistema de puntuación de los síntomas, pero este sistema es subjetivo y su correlación con la inflamación definida histológicamente no es tan consistente como con calprotectina fecal. El curso clínico de la mayoría de pacientes con IBD está marcado por periodos de remisión con recurrencias intermitentes que implican una exacerbación de la inflamación intestinal. El monitoreo de los niveles fecales de calprotectina tiene un rol esencial en determinar la efectividad de la terapia y es un buen predictor de las recurrencias potenciales, permitiendo un mejor manejo de la enfermedad. |
| Muestra | Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado. Calprotectina es estable hasta por 3 días a temperatura ambiente. Sin embargo, recomendamos mantener la muestra a 4–8°C (temperatura de refrigerador). Para almacenamiento prolongado de la muestra recomendamos –20°C (temperatura de congelador). |
| Recipiente | Frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética |
| Cantidad | Mínimo 10 g – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes |
| Preparación previa a la prueba | No se requiere |
| Contraindicaciones | Ninguna |
| Instrucciones para obtención y transporte de la muestra | Obtener la muestra en frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética. No colectar la muestra en recipientes que contengan medios de transporte, formol o compuestos similares, iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes. No mezclar la muestra con orina, cremas, talco o sustancias desinfectantes. Colectar la mayor cantidad posible. En niños pequeños colocar el pañal al revés (por la parte no absorbente), cubrir la salida de la uretra con un trozo de algodón (para no contaminar la muestra con orina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal no son aceptables. Enviar la muestra al laboratorio inmediatamente después de su obtención. Muestras que no pueden ser enviadas al laboratorio de inmediato o que son enviadas de lugares fuera de Lima deben mantenerse en refrigeración (4°C – 8°C). La muestra es estable hasta 3 días a temperatura ambiente, hasta 8 días en refrigeración (4°C – 8°C) y hasta 30 días en congelación (-20°C). |
| Método de análisis | Inmunoensayo enzimático (ELISA) de microplaca en fase sólida. El ensayo utiliza la técnica de doble sándwich con dos anticuerpos monoclonales que se unen específicamente a calprotectina humana. Los estándares, controles y muestras de pacientes se colocan en los pocillos de la microplaca recubiertos de un anticuerpo monoclonal anti-calprotectina humana. Durante la primera incubación la calprotectina contenida en la muestra se une al anticuerpo. A continuación se añade el conjugado marcado con peroxidasa y se forma un complejo anticuerpo de captura-calprotectina humana-conjugado de peroxidasa. Como sustrato para la peroxidasa se agrega tetramethylbenzidine (TMB). Finalmente, se detiene la reacción con una solución ácida de stop. El color cambia de azul a amarillo. La intensidad del color amarillo es directamente proporcional a la concentración de calprotectina. La densidad óptica de la reacción de color se lee con el lector de ELISA BioTek™. Se genera una curva dosis-respuesta de densidad óptica vs concentración con estándares de concentración creciente de calprotectina. La concentración de calprotectina presente en la muestra se determina directamente de esta curva con el ELISA-software Gen5™ usando un modelo de regresión linear con escala lin-log. La concentración de calprotectina se expresa en µg/g de heces. |
| Tiempo de entrega de resultados | Este examen se corre una vez a la semana; los resultados se entregan de 1 a 6 días, desde recibida la muestra. |
| Rango de resultados | La concentración de calprotectina fecal se determina en el rango de 0 a 2,100 µg/g de heces. Concentraciones encima del rango superior se expresan como >2,100 µg/g de heces. |
| Interpretación de resultados | Calprotectina fecal < 50 µg/g: Normal. Indica que no hay inflamación en el tracto gastrointestinal. Las personas con niveles bajos de calprotectina fecal normalmente no necesitan más investigaciones por procedimientos invasivos. Calprotectina fecal entre 50 y 100 µg/g: Indica inflamación intestinal leve a moderada. Puede ocurrir por una enfermedad orgánica leve como inflamación causada por AINES, diverticulitis leve o Enfermedad Inflamatoria Intestinal (IBD) en fase de remisión. Se sugiere repetir el examen y realizar investigaciones adicionales. Calprotectina fecal > 100 µg/g: Indica enfermedad orgánica activa con inflamación moderada a severa en el tracto gastrointestinal. Se sugiere llevar a cabo investigaciones adicionales apropiadas incluyendo procedimientos invasivos. (Manz M, et al. Value of fecal calprotectin in the evaluation of patients with abdominal discomfort: an observational study. BMC Gastroenterol 2012;12:5) Los valores de calprotectina fecal en niños sanos menores de 4 años de edad pueden ser normalmente más altos. El punto de corte de 50 µg/g de calprotectina fecal es válido únicamente de los 4 años de edad en adelante. (Li F, et al. Fecal calprotectin concentrations in healthy children aged 1-18 months. PLoS ONE 2015 Mar 5;10(3):e0119574) (Hestvik E, et al. Faecal calprotectin concentrations in apparently healthy children aged 0-12 years in urban Kampala, Uganda: a community-based survey. BMC Pediatr 2011;11:9) Esta información es sólo para ser tomada en cuenta. El médico es el más indicado para decidir lo que se deba hacer en base a los síntomas, el cuadro clínico y el resultado de esta prueba. |
| Limitaciones y recomendaciones |
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| Horario de recepción de muestras | Lunes a Viernes de 8:00 AM a 4:00 PM |
| Referencias |
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| Ultima revisión | Julio 2022 |